選擇elisa試劑盒要考慮哪些因素
更新時間:2022-12-23 點擊次數(shù):874
elisa試劑盒在實驗室已經(jīng)相當(dāng)普及,絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多,ELISA試劑盒不僅可以讓實驗更便利,往往還更加?,F(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國產(chǎn)也有進口,數(shù)量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出適用的產(chǎn)品呢?
首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測的分子進行檢測,除此以外也還有一些需要加以考量的因素。
首先明確檢測何種蛋白。
第二步、明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性較好。
第三步、尋找檢測這些物種蛋白的試劑盒。
第四步、咨詢商家ELISA是試劑盒使用的抗體類型:多抗還是單抗?單抗是針對什么抗原決定簇的?
第五步、做出自己的判斷該買哪個試劑盒。
ELISA試劑盒有多種類型,不過它們都有一個共同特點,就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型,In-cell ELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進行固定和通透化,然后再用抗體原位檢測。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞,然后在膜上檢測細(xì)胞分泌的抗原形成斑點。此外,我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進行ELISA實驗。
通常人們使用雙抗夾心法進行ELISA實驗,雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間,這種方法既靈敏又有效,受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法并不是選擇,例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著,又或者抗體只有一個抗體結(jié)合位點。在上述情況下,競爭性ELISA就更為適用,這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無標(biāo)記的抗原進行競爭,以結(jié)合捕獲抗體。